| 种属 | 人 |
| 产品介绍 |
永生化人乳腺祖细胞-hTERT通过人端粒酶逆转录酶永生化建立，保留了乳腺上皮祖细胞的关键特性。这些细胞具有自我更新能力和向腔上皮及肌上皮分化的双向潜能，表达乳腺干细胞标志物。hTERT永生化方式保留了细胞的正常核型和生理功能，无病毒癌基因转化带来的干扰。该细胞系为研究乳腺发育、乳腺干细胞调控、乳腺癌发生起源以及乳腺组织工程提供了宝贵的人源体外模型，在乳腺生物学和癌症研究中具有重要应用价值，可用于乳腺癌发病机制研究和靶向药物筛选。 |
| 物种 | 人（H. sapiens） |
| 组织来源 | 乳腺 |
| 供体背景 | 雌性 |
| 生长特性 | 贴壁，铺路石状 | 在乳腺上皮生长培养基中培养时为梭形 |
| 产品形式 | 冻存 |
| 预期用途 | 本产品仅供实验室研究使用，不适用于任何动物或人类的治疗用途，不适用于任何人类或动物消费用途，也不适用于任何诊断用途。 |
| 生物安全等级 | II级（BSL-2） |
| 分析证书 | 如需特定批次的检测结果，请参阅 www.abmgood.com 上相应的分析证书（COA）。 |
| 培养条件 | 为获得最佳培养效果，推荐使用PriCoat™ T25培养瓶（G299）或Applied Cell细胞外基质（G422）。 优化培养基为了表达基底、腔面和干细胞标志物以及部分肌上皮细胞标志物（a-SMA、CD10、Thy-1），应在DFCI-1培养基中培养细胞。配制DFCI-1时，基础培养基为Prigrow VIII和Prigrow IV（1:1，体积比）培养基，可从ABM（TM018和TM004）。要配制完全生长培养基，请在基础培养基中添加以下成分：1% FBS*、1%青霉素/链霉素溶液（G255），10 mM HEPES（Gibco）、12.5 ng/ml重组人EGF（Z100139），6.5 ng/ml三碘甲状腺原氨酸（Sigma）、0.545 ng/mlβ-雌二醇（Sigma）、1 µg/ml胰岛素（TM053），1 µg/ml氢化可的松（Sigma）、0.006X乙醇胺（Sigma）、14.1 µg/ml磷酸乙醇胺（Sigma）、10 µg/ml转铁蛋白（Sigma）、2 mM L-谷氨酰胺（G275），2.6 ng/ml亚硒酸钠（Sigma）、1 ng/ml霍乱毒素（Sigma）、35 µg/ml牛垂体提取物（Hammond Cell Tech），以及新鲜添加的10 µg/ml抗坏血酸（Sigma）。 二氧化碳（CO2）：5%，温度：37.0°C。每2-3天更换培养基。 ＊除非另有说明，否则请勿在细胞培养中使用热灭活FBS。 为使细胞在紧密的上皮细胞集落周围呈现梭形形态并出现mucin-1阳性细胞：在乳腺上皮生长培养基（MEGM；Lonza）中培养细胞，添加B27（每500 ml培养基10 ml）、20 ng/ml重组人EGF（Z100139），20 ng/ml重组人FGF2（Z101455），4 µg/ml肝素和1%青霉素/链霉素溶液（G255）。二氧化碳（CO2): 6.5%, Temperature: 37.0°C. 有关细胞分化的信息，请参阅“文档”选项卡下的分化方案PDF。 |
| 永生化方法 | 连续传代，并用携带hTERT基因的重组逆转录病毒转导 |
| 表达特征 | a-SMA, CD10, and Thy-1 (with DFCI-1 media conditions). K5, K14, vimentin, E-cadherin, p63, K8, K18, K19, CD29, CD49f |
| 保藏人 | University of Nebraska Medical Center |
| 质量控制 | 1）Western印迹评估细胞谱系相关和干细胞标志物；2）谱系标志物的免疫荧光染色分析；3）基因调控通路的基因表达谱分析 |
| 应用领域 | 仅供研究使用。 |
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