产品介绍 | 极速五分蛋白定量试剂盒是一款基于创新螯合技术的高效蛋白质浓度检测工具,其原理与传统 BCA 法同源,但通过突破性的螯合剂优化,实现了检测效率与性能的双重升级,适用于科研、生物制药及临床检测等领域的蛋白质定量分析。在碱性条件下,蛋白质分子中的肽键与铜离子(Cu²⁺)发生络合反应,促使 Cu²⁺ 被还原为亚铜离子(Cu⁺)。本试剂盒采用全新特异性螯合剂替代传统 BCA 试剂,该螯合剂可在室温下快速捕获 Cu⁺,以 1∶2 的摩尔比形成稳定的橙黄色水溶性复合物。此复合物在 480 nm 波长处具有强烈吸光特性,其颜色深浅与蛋白质浓度呈严格的线性正相关,通过测定吸光度即可精准计算样品中的蛋白质含量。配套即用型蛋白质标准品溶液(系列浓度预配完成),无需稀释,可直接绘制标准曲线,快捷省时。 | |||||||||||||||||||||||
应用范围 | 蛋白定量 | |||||||||||||||||||||||
保存条件 | BSA标准品-20℃保存,其他组分4℃保存 | |||||||||||||||||||||||
产品组分 |
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注意事项 |
1. 蛋白标准溶液提前放到室温融化,并且上下颠倒混匀,所有试剂在使用前均恢复至室温后使用。 2. 建议每次测定蛋白样品时,都要绘制标准曲线,使测量结果准确,条件允许时,每个标准品和待测样品均建议测定 ≥ 2 个平行反应(至少复孔),以提高测量的准确性。 3. 加入工作液于室温条件反应 5 min 后,务必在 30 min 内读数,否则将超出酶标仪测量度数范围。 4. 建议使用多道移液器快速准确地加入工作液,避免同批次实验不同孔位间出现 1 min 以上的时间差导致试剂反应进度差距过大。 5. 当试剂 B 加入到试剂 A 时,开始可观察到有浑浊产生,属于正常现象,经搅拌后浑浊会迅速消失,得到绿色澄清工作液。 6. 本产品支持酶标仪微孔法与分光光度计比色皿法检测蛋白浓度。采用分光光度计时,需依据比色皿最小检测体积调整 BCA 工作液用量(确保不低于其最小体积),样品及标准品用量需按同比例放大。受此影响,使用分光光度计检测时,单个试剂盒可测定的样品数量会显著减少。 7. 本产品仅限于科研用途并且不得存放于普通住宅内。 8. 为了您的安全和健康,请遵循您所在常规实验室安全规定。 |
1. 问:是否每次测定时都需要做标准曲线?
答:建议每次测定都随样品做标准曲线。本产品显色反应比较迅速,且显色反应的时间和温度会直接影响测定时的吸光度,在1 分钟内也会显示出差异。
2. 问:和其他方法检测结果差异大?
答:与其他蛋白定量方法(如紫外分光光度法在280 nm 测吸光值)相比,所得蛋白浓度结果不同。因为不同蛋白氨基酸组成有差异,与BCA 试剂相互作用不同,吸光情况有区别。
3. 问:在绘制标准曲线时,随标准品浓度升高,吸光度及颜色变化未达预期显著程度?
答:这可能是由于样品中含有如DTT、巯基乙醇、TCEP 等还原剂,这类物质会对蛋白浓度检测产生干扰。建议先对样品进行稀释处理,或通过适当纯化步骤去除干扰成分后再进行测定。常见干扰物质兼容性见附件表格。
4. 问:如果样品比较珍贵或者原液体积较少,不足20 μL,该如何进行检测?
答:针对样品量较少的情况可以直接进行相应比例稀释后的样品进行检测,上样量要与标准品保持一致,否则检测结果容易出现远高于实际浓度的情况。