产品介绍 | SafeView™ Gold(10,000×in Water)是用于核酸凝胶电泳的一款高灵敏、无致突变性的安全性荧光染料。SafeView™Gold 核酸染料主要适用于蓝光亦兼容于紫外凝胶成像系统。 |
应用范围 | 核酸凝胶电泳 |
保存条件 | 室温,常温运输。 |
注意事项 |
1. 本产品在紫外下成像效果不如蓝光,因此推荐使用蓝光切胶仪/蓝光凝胶成像系统。2. 推荐使用TAE电泳缓冲液并及时更换,保持电泳缓冲液新鲜。3. 染料无需低温冷藏,请于室温下储存,室温下储藏过久可能会出现干管现象,可以直接加入蒸馏水并加热 45-50 ℃ 进行震动充分溶解后即可。若放置低温包括 4℃,若发现沉淀,请将染料加热至 45-50 ℃,振荡溶解,亦不影响使用效果。4. 本产品仅限于科研用途并且不得存放于普通住宅内。5. 为了您的安全和健康,请遵循您所在常规实验室安全规定。 |
1. 问:为什么染 RNA 的效果不如染DNA的好?
答:此款核酸染料都与 dsDNA、ssDNA 和RNA结合,但敏感性不同。相对于 ssDNA 和 RNA,此款染料对应 dsDNA 的敏感性更好。RNA 本身就容易分解,导致跑电泳时会分解,效果会更差。
2. 问:跑胶时发现条带光亮度很弱或者背景很强如何改善?
答:1)条带亮度减弱,极大困难是染料从溶液中沉淀析出,此时可以将本产品溶液加热至45-55度之间3-5分钟,然后涡旋溶解即可;2)背景高,极大可能是琼脂糖质量不佳导致。
3. 问:跑电泳时出现模糊条带或者笑脸条带、条带扭曲甚至条带会多出,如何解决?
答:由于本款染料属于大分子和高亲和力染料,旨在提高其安全性,由此会影响到预制胶中的 DNA 迁移。解决方案如下:1)减少 DNA 上样量,一般推荐为原上样量的三分之一左右即可;2)使用较低含量琼脂糖的凝胶,较高分子量的 DNA 会分离效果更好;3)出现多的条带是由于本产品特别高的灵敏度导致,DNA 样本不纯,通常这种不纯条带在灵敏度低的染料如 EB 无法被检测出来。
4. 问:此款染料可以用于甲醛基 RNA 凝胶和聚丙烯酰胺凝胶?
答:答:1)可以;2)使用聚丙烯酰胺凝胶时,推荐用后染法,如对于含有 3.5%-10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝胶,典型的染色时间为 30 分钟至 1 小时,丙烯酰胺含量较高的凝胶需要更长的染色时间。
5. 问:此产品是否与克隆、连接和测序等下游应用兼容?
答:对。一些用户反馈称,在本染料存在的情况下对 DNA 进行 PCR,无需纯化步骤,例如通过在 TE 缓冲液中孵育本款产品染色的凝胶切片,通过被动扩散提取 DNA 用于 PCR,或使用几微升来自含有 DNA 的本款产品染色凝胶切片的熔融琼脂糖用于 PCR。
6. 问:在熔融的琼脂糖里面,本款染料的稳定性如何?
答:我们不建议将 Super SafBlue 在熔融琼脂糖中储存超过几天。但是未使用的含有本款染料的凝固琼脂糖可以重新熔化。如果未使用的含染料琼脂糖要储存一天左右,我们建议将其避光保存。
7. 问:染色后,建议采用哪些纯化方案去除 Super SafBlue
答:我们建议使用我们的 DNA 凝胶提取试剂盒从 DNA 样本中去除本款染料,但一些客户报告说,通过苯酚-氯仿提取成功去除了本款染料。客户还反馈说,使用 Zymo Research 的 ZymoCleanTM 凝胶 DNA 回收试剂盒、Sigma 的GenEluteTM 琼脂糖旋转柱、Life Technologies 的 PureLink® 快速凝胶提取试剂盒、GE Healthcare 的 illustra GFX PCR DNA 和凝胶带纯化试剂盒、罗氏应用科学公司的高纯 PCR 产品纯化试剂盒和 Thermo Scientific 的 GenJE T凝胶提取试剂箱,效果良好。